成像技术的进步,以及配套工具的发展,正为我们呈现出一个五彩斑斓的生物学世界。如今,我们可以观察细胞网络,窥探细胞内部,并实时观察各种生物学过程。这一切,都离不开显微镜。
显微镜相机捕获了一个不为人知的微观世界,让我们对大自然的复杂精巧赞叹不已。目前市场上有许许多多的显微镜可供选择,单就相机而言,它们的各种复杂参数就让人云里雾里。如何选择一款合适的相机呢?
一个关键点是选择合适的光学组件,能够捕捉各种现象,然后是选择与之匹配的相机。如果物镜的光学分辨率低于你要观察的结构,那么任何相机都帮不上忙。”
如何选择相机?
相机列出了许多参数,而你很难确定哪些参数重要,以及它们对图像质量到底有没有影响。此外,一些关键的参数可能无法同时达到。例如,调整读取噪声可能会影响速度。重要的三个参数是:灵敏度、分辨率和速度。
同时,你还要研究一下动态范围、快门模式以及附带的软件包。
另外,所有专家都提醒,如果没有用你自己的样品做过演示,千万不要买。这是确定哪款相机满足您需求的方法。正所谓有得也有失。如果你现在无法确定相机的主要用途,那么可以选择全能型的sCMOS。
事实上,sCMOS总是被专家反复推荐。无论是明场还是荧光成像,无论是单一还是混合成像,sCMOS也许都是好的选择,
任何相机都无法检测到低端显微镜所丢失的信息。从另一方面来说,若使用低端相机,那么搭配很好的物镜也没有意义。“平衡,这就是显微镜专家为帮助客户找到解决方案而做的事情。”
五个考虑因素
sCMOS相机是如今的“全能型”相机。若需要在不同光照水平下使用显微镜,可考虑这个选项。
对显微镜的相机而言,相机灵敏度可能是重要的参数。共聚焦或光场显微镜等技术本身就是低光度,因此使用灵敏的相机。换句话说,明视场显微镜不需要同样的灵敏度。
灵敏度取决于信噪比(SNR),当然越高越好。为了获得良好的信噪比,相机的量子效率(QE)要高,而读取噪声(Nr)要低。噪声取决于所需的曝光类型。
分辨率指的是相机可捕捉的细节量,取决于像素大小和视野。在较低的放大倍数下,较小的像素可提供较高的空间分辨率。不过,与较大的像素(如EMCCD相机)相比,信噪比会更低。关键是确定一种像素大小,既能提供足够的分辨率,又能提供良好的信噪比。
速度应当取决于捕获的现象。例如,钙成像就需要尽可能快的帧速率。相机需要足够灵敏,才能快速曝光。当速度是关键考虑因素时,sCMOS相机也许是合适的选择。