光学显微镜的照明方式多种多样,以适应不同样品特性和观察需求。以下是几种常见的照明方式:
直接照明:
光线直接射向物体,用于获取清晰的影像,尤其在需要高对比度的图像时使用。
散射照明:
提供无方向、不刺眼的柔和光线,适合高反射的物体,能够减少反光和眩光,提高观察舒适度。
背面照明:
光线从物体背面射来,形成均匀的视场光,常用于测量物体的尺寸和确定物体的方向,对于透明或半透明样品尤为有效。
同轴照明:
通过特定设计,使光源以垂直向下的方式照射物体表面,形成均匀的照明效果。这种照明方式对检测高反射的平面物体很有帮助,能够减少反射光对观察的影响。
透射光照明:
适用于透明或半透明的被检物体,特别在生物学显微镜中广泛应用。透射光照明可以分为中心照明和斜射照明两种。中心照明中,光束的中轴与显微镜的光轴同在一条直线上,又进一步细分为临界照明和柯勒照明(库勒照明)。柯勒照明通过特殊的光学设计,使光源发出的光先经过毛玻璃等散射元件,再经过透镜将光线均匀地照射在样品上,即使光源本身亮度不均匀,也能在标本上形成均匀的照明,同时减少杂散光的影响。
暗视场照明:
光线以一定倾斜角度投射到物体表面,使倾斜的散光进入相机,从而在暗的背景下创造明亮的点或线条。这种照明方式适用于观察表面细节和结构,特别是当样品本身对比度较低时,能够有效提高图像的对比度。
斜照明:
也称斜射照明,光线从侧面斜射到样品上,能够产生一定的立体感,使样品中一些原本不易观察到的结构凸显出来。斜照明方式常用于细胞培养室中的倒置显微镜中。
莱茵伯格照明(暗场照明的特殊形式):
实际上是暗场照明的一种变体,通过在光源通过聚光器的路上插入彩色的透明滤光片,可以用颜色来区分样品中不同空间的成分,增强观察的多样性和准确性。
每种照明方式都有其独特的应用场景和优势,选择合适的照明方式对于提高观察效果至关重要。在实际应用中,可以根据样品的性质、观察目的以及显微镜的性能特点来灵活选择和使用不同的照明方式。